Cele fosforylacji p47phox, podjednostki oksydazy z pęknięciem oddechowym. Funkcje poszczególnych docelowych selin ocenianych przez ukierunkowaną mutagenezę.

Oksydaza wywołana wybuchem oddechowym fagocytów i limfocytów B katalizuje redukcję tlenu do O2- kosztem NADPH. Uśpiony w komórkach spoczynkowych, oksydazę aktywuje się, eksponując komórki na odpowiednie bodźce. Podczas aktywacji, p47phox, podjednostka cytosolowej oksydazy, ulega znacznej fosforylacji w szeregu selin zlokalizowanych pomiędzy S303 i S379. Aby określić, czy ta fosforylacja jest konieczna do aktywacji oksydazy, zbadaliśmy aktywność oksydazy wywołanej przez receptor, u transformowanych EBV limfoblastów B z niedoborem p47phox po transfekcji plazmidami eksprymującymi różne mutanty S-> A p47phox. Mutanty zawierające mutacje S -> A obejmujące wszystkie seryny między S303 a S379 [S (303-379) A] nie były fosforylowane, nie ulegały translokacji do błony komórkowej podczas aktywacji i były prawie pozbawione funkcji. Read more „Cele fosforylacji p47phox, podjednostki oksydazy z pęknięciem oddechowym. Funkcje poszczególnych docelowych selin ocenianych przez ukierunkowaną mutagenezę.”

Uwalnianie aktywności stymulującej kolonię z limfocytów pochodzących z grasicy.

Aktywność stymulująca kolonię (CSA) jest niezbędna do różnicowania in vitro komórek szpiku kostnego do kolonii granulocytów i komórek jednojądrzastych. Podczas gdy monocyty krwi i makrofagi są głównym źródłem CSA, ostatnie badania wykazały, że CSA może być wytwarzany przez limfocyty reagujące na stymulację immunologiczną. Limfocyty, oczyszczone ze śledziony i grasicy myszy za pomocą kolumn z wełny szklanej, inkubowano w pożywce CMRL-1066 z płodową surowicą cielęcą in vitro. Limfocyty z śledziony i śledziony uwalniały CSA podczas hodowli in vitro, przy szczytowych poziomach CSA obserwowanych po 7 dniach inkubacji. Stymulacja kultur za pomocą fitohemaglutyniny, konkanawaliny A lub mitogenu szkarłatnego powodowała 2-5-krotny wzrost uwalniania CSA, przy szczytowych poziomach CSA uwalnianych po 4 dniach inkubacji. Read more „Uwalnianie aktywności stymulującej kolonię z limfocytów pochodzących z grasicy.”

Porównawcza analiza zdolności wiązania C1 fragmentów pochodzących z białek IgM wiążących dopełniacz i utrwalających.

Celem tego badania było zbadanie parametrów molekularnych koniecznych do rozpoczęcia wiązania dopełniacza przez białka IgM. Aby określić, dlaczego niektóre cząsteczki IgM są zdolne do wiązania dopełniacza, podczas gdy inne nie są, zbadano kilka różnych białek IgM Waldenström pod kątem ich zdolności do ustalania całkowitego dopełniacza hemolitycznego w teście CH (50). Następnie badano zdolność wiązania C1 fragmentu o 56 resztach pochodzących z domeny Cmu4 każdej z tych cząsteczek IgM z testem wiązania C1. Stwierdzono, że jedno z trzech białek IgM Waldenström (Gr) zastosowane w niniejszym badaniu nie może spożywać dopełniacza w teście CH (50), gdy testuje się je w tym samym stężeniu, co dwie cząsteczki IgM (Dau i Bus), które pochłaniają dopełniacz. Jednakże, gdy 56-resztowy fragment C (H) 4 z domeny Cmu4 każdej cząsteczki IgM był testowany na zdolność wiązania C1, wszystkie trzy okazały się wiązać C1. Read more „Porównawcza analiza zdolności wiązania C1 fragmentów pochodzących z białek IgM wiążących dopełniacz i utrwalających.”

Nieodwracalna metaplazja komórek kubkowych oskrzeli u chomików z rozedmą wywołaną elastazą.

Pojedyncze wpajanie dotchawicze elastazy trzustkowej u chomików wywołuje zmianę przypominającą rozedmę ludzkiego panacarinu. W pracy przedstawiono występowanie nieodwracalnej metaplazji komórek kubkowych w nabłonku oskrzeli chomików, podobnie narażonych na działanie elastazy. Zmiana komórki kubkowej była zależna od dawki; dawka 0,1 mg / 100 g masy ciała lub mniej po 16 dniach, powodowała niewielką lub umiarkowaną metaplazję komórek kubkowych u mniej niż połowy zwierząt, podczas gdy 84% zwierząt leczonych dawką między 0,2 a 0,5 mg / 100 g masy ciała rozwinęło się metaplastyczne zmiany komórek kubkowych, z których ponad połowa została uznana za ciężką. Odsetek komórek kubkowych w nabłonku chomików leczonych elastazą (32,5) był znacząco wyższy (P mniej niż 0,005) niż dla nie wystawionych na działanie ekstraktu (12,2) i kontrolnych ekspozycji na sól fizjologiczną (18,7). Wszystkie chomiki przebadano 6 i 12 miesięcy po tym, jak zabieg elastazy wykazał zmianę. Read more „Nieodwracalna metaplazja komórek kubkowych oskrzeli u chomików z rozedmą wywołaną elastazą.”

Modulacja in vitro akumulacji cisplatyny w ludzkich komórkach raka jajnika poprzez farmakologiczną zmianę mikrotubul.

Wykazaliśmy wcześniej, że forskolina i 3-izobutylo-1-metyloksantyna (IBMX) zwiększają akumulację cisplatyny (DDP) w wrażliwych na DDP komórkach ludzkiego raka jajnika z 2008 r., Proporcjonalnie do ich zdolności do zwiększania cAMP. Ponieważ główną funkcją cAMP jest aktywacja kinazy białkowej A, przypuszczano, że stymulacja akumulacji DDP była mediowana przez substrat kinazy białkowej A. Obecnie wykazujemy, że ekspozycja komórek 2008 na forskolin doprowadziła do fosforylacji ważnego białka błonowego 52 kD. Mikrosekwencjonowanie zespołu wykazało, że jest to ludzka beta-tubulina. Podobnie, wstępne traktowanie komórek z 2008 r. Read more „Modulacja in vitro akumulacji cisplatyny w ludzkich komórkach raka jajnika poprzez farmakologiczną zmianę mikrotubul.”